摘要5-7
ABSTRACT7-9
致谢9-15
第一章 绪论15-27
1.1 乳酸的性质与运用15-16
1.1.1 乳酸的结构与性质15
1.1.2 乳酸的运用15-16
1.2 米根霉利用木质纤维素发酵产 L-乳酸探讨进展16-17
1.3 微生物的木糖代谢探讨进展17-19
1.3.1 微生物的木糖代谢途径17-18
1.3.2 木糖的运输18
1.3.3 木糖代谢基因工程菌的构建18-19
1.4 基因组改组技术19-22
1.4.1 基因组改组技术的原理和优势19-21
1.4.2 基因组改组技术的运用近况21-22
1.5 双向电泳技术22-24
1.5.1 双向电泳技术的原理22-23
1.5.2 双向电泳技术在微生物学中的运用近况23-24
1.6 本课题探讨的目的、作用及主要内容24-27
1.6.1 本课题探讨的目的、作用24-25
1.6.2 本课题探讨的主要内容25-26
1.6.3 本论文的探讨框架图26-27
第二章 木糖发酵 L-乳酸高产菌株的~(60)Co-γ射线诱变选育27-35
2.1 材料与策略27-30
2.1.1 菌种与试剂27-28
2.1.2 仪器与设备28
2.1.3 培养基28
2.1.4 培养策略28-29
2.1.5 检测策略29-30
2.2 实验案例30-31
2.2.1 菌株的活化30
2.2.2 单孢子悬液的制备30
2.2.3 ~(60)Co-γ射线诱变处理30
2.2.4 诱变效果的计算30-31
2.2.5 高产突变株的筛选31
2.2.6 高产突变株的遗传稳定性考察31
2.3 结果与浅析31-34
2.3.1 ~(60)Co-γ射线对米根霉的诱变效应31-32
2.3.2 木糖发酵 L-乳酸高产突变株的筛选32-33
2.3.3 高产突变株的遗传稳定性33-34
2.4 本章小结34-35
第三章 米根霉原生质体电融合条件探讨35-45
3.1 材料与策略35-37
3.1.1 菌种与试剂35-36
3.1.2 仪器与设备36
3.1.3 培养基36
3.1.4 混合酶液36
3.1.5 电融合缓冲液36
3.1.6 孢子斜面培养策略36
3.1.7 菌悬液的制备策略36
3.1.8 原生质体的制备、再生及电融合策略36-37
3.2 实验案例37-39
3.2.1 不同的渗透压缓冲液对原生质体制备及再生的影响37
3.2.2 原生质体排队现象的观察37-38
3.2.3 原生质体灭活条件的选择38
3.2.4 原生质体电融合参数的选择38-39
3.3 结果与浅析39-44
3.3.1 渗透压缓冲液对原生质体制备及再生的影响39-40
3.3.2 原生质体排队现象的观察40-41
3.3.3 原生质体灭活条件的选择41-42
3.3.4 电融合参数的选择42-44
3.4 本章小结44-45
第四章 基因组改组选育木糖发酵 L-乳酸高产菌株45-58
4.1 材料与策略45-50
4.1.1 菌种与试剂45-46
4.1.2 仪器与设备46
4.1.3 培养基46
4.1.4 培养策略46-47
4.1.5 原生质体的制备、灭活及电融合策略47
4.1.6 检测策略47-50
4.2 实验案例50-51
4.2.1 第一轮基因组改组50-51
4.2.2 第二轮基因组改组51
4.2.3 改组菌株、突变株和原始菌株的发酵特性比较51
4.2.4 改组菌株、突变株和原始菌株的 XR、XDH、LDH 酶活比较51
4.3 结果与浅析51-57
4.3.1 木糖发酵 L-乳酸高产菌株的基因组改组选育51-54
4.3.2 改组菌株、突变株和原始菌株的发酵特性比较54-56
4.3.3 改组菌株、突变株和原始菌株的 XR、XDH、LDH 酶活比较56-57
4.4 本章小结57-58
第五章 改组菌株、突变株、原始菌株的比较蛋白质组学探讨58-78
5.1 材料与策略58-65
5.1.1 菌种与试剂58-59
5.1.2 仪器与设备59
5.1.3 溶液的配制59-60
5.1.4 蛋白样品的制备策略60-61
5.1.5 蛋白质浓度的测定61
5.1.6 双向电泳操作策略61-65
5.2 实验案例65
5.2.1 蛋白溶解液的确定65
5.2.2 改组菌株、突变株、原始菌株双向电泳图谱的比对浅析65
5.2.3 差别蛋白点的鉴定65
5.3 结果与浅析65-77
5.3.1 蛋白溶解液的选择65-67
5.3.2 改组菌株、突变株、原始菌株双向电泳图谱的比对浅析67-75
5.3.3 差别蛋白点的鉴定75-77
5.4 本章小结77-78
第六章 结论与展望78-80
6.1 结论78-79
6.2 展望79-80