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新型常压质谱技术,生物样品,表面解吸常压化学电离,中性解吸电喷雾萃取电离,内部电喷雾萃取电离,主成分分析,

收藏本文 2024-01-26 点赞:15092 浏览:46195 作者:网友投稿原创标记本站原创

摘要:质谱技术因其具有高灵敏度、高准确性、快速、易于自动化等特点,已逐渐成为生命科学探讨领域中不可或缺的浅析手段。在传统的质谱浅析中,生物样品通常需要经过分离、萃取等较复杂的预处理历程,耗时费力,而且很可能会损失样品中的一些有用信息。近年来,出现了多种新型的常压质谱技术,使得生物样品可以在只需极少甚至不需要预处理的条件下直接在常压环境中完成离子化并被引入质谱仪浅析。这些新型的质谱技术推动了生命浅析领域的迅速进展。本论文介绍了几种新型常压质谱技术在血清、痰液及生物组织浅析中的运用,主要内容包括:1.无需样品预处理,采取自制的纳升级微量取样器,利用DAPCI-MS技术对微量血清和痰液进行直接浅析,并结合多元统计主成分浅析法(PCA)进行数据处理。结果表明,DAPCI能检测出微量血清和痰液中丰富的样品信息,证明了耦合微量取样器的DAPCI-MS技术,是一种微创、简易、灵敏的的技术手段,适用于珍稀样品的浅析。2.无需复杂样品预处理,利用ND-EESI-MS技术,对非小细胞肺癌(NSCLC)患者和非肺癌志愿者的痰液样品进行直接浅析,并结合PCA进行数据处理。结果表明,ND-EESI-MS技术能耐受粘稠基质的影响,有效地解吸并检测痰液样品中的小分子化合物,且利用PCA能有效区分NSCLC组和对照组,说明该策略结合PCA,有助于快速、无创地诊断NSCLC。3.无需样品预处理,利用Tip-Spray-MS技术,对生物组织进行直接浅析,并结合PCA进行数据处理。结果表明,Tip-Spray-MS技术具有快速、灵敏、高通量、需样量少等特点,可作为临床活组织检测的辅助浅析手段,且利用PCA能有效区分肺癌组与对照组,为肺癌的早期诊断提供了新的技术思路。4.开发了内部电喷雾萃取电离质谱(Internal EESI-MS)技术,探讨了InternalEESI的机理,并利用该技术对生物组织进行了直接浅析。结果表明,萃取解吸附作用在Internal EESI历程中起重要作用,且该策略用于生物组织浅析,具有较高的灵敏度,能萃取出样品内部大量的物质。而选择不同极性的ESI溶剂,可以获取样品中不同的物质信号,以而能更全面的获取样品内部信息,可为临床组织活检提供更多的生物组织中的化学信息。关键词:新型常压质谱技术论文生物样品论文表面解吸常压化学电离论文中性解吸电喷雾萃取电离论文内部电喷雾萃取电离论文主成分浅析论文

    摘要4-5

    ABSTRACT5-9

    第一章 绪论9-25

    1.1 生物样品浅析介绍9

    1.2 传统的生物样品浅析策略9-11

    1.2.1 荧光光谱法9-10

    1.2.2 红外光谱法10

    1.2.3 化学发光法10

    1.2.4 核磁共振光谱法10-11

    1.3 传统质谱策略及其在生物样品浅析中的运用11-12

    1.3.1 毛细管电泳-质谱联用法11-12

    1.3.2 气相色谱-质谱联用法12

    1.3.3 液相色谱-质谱联用法12

    1.4 新型常压质谱技术及其在生物样品中的运用12-23

    1.4.1 新型常压质谱技术的概述12-14

    1.4.2 表面解吸常压化学电离质谱技术及其在生物样品浅析中的运用14-16

    1.4.2.1 DAPCI-MS 的结构及原理14-15

    1.4.2.2 DAPCI-MS 在生物样品中的运用15-16

    1.4.3 电喷雾萃取电离质谱技术及其在生物样品浅析中的运用16-20

    1.4.3.1 EESI-MS 的结构及原理16-17

    1.4.3.2 ND-EESI-MS 的结构及原理17-18

    1.4.3.3 EESI-MS 在生物样品浅析中的运用18-20

    1.4.4 尖端电喷雾萃取电离质谱技术及其在生物样品浅析中的运用20-23

    1.4.4.1 Tip-Spray-MS 的结构及原理20-23

    1.4.4.2 Tip-Spray-MS 在生物样品浅析中的运用23

    1.5 论文的工作要点及革新点23-25

    第二章 表面解吸常压化学电离质谱技术在微量血清、痰液浅析中的运用25-33

    2.1 引言25

    2.2 实验部分25-26

    2.2.1 仪器和试剂25-26

    2.2.2 实验条件26

    2.3 结果及讨论26-31

    2.3.1 血清样品的 DAPCI-MS 的谱图浅析26-27

    2.3.2 血清样品的 DAPCI-MS 谱图的主成分浅析27-28

    2.3.3 痰液样品的 DAPCI-MS 的谱图浅析28-30

    2.3.4 痰液样品的 DAPCI-MS 谱图的主成分浅析30-31

    2.4 小结31-33

    第三章 中性解吸电喷雾萃取电离质谱技术在痰液浅析中的运用33-45

    3.1 引言33

    3.2 实验部分33-34

    3.2.1 仪器与试剂33-34

    3.2.2 ND-EESI-MS 参数和实验条件34

    3.3 结果及讨论34-43

    3.3.1 痰液的 ND-EESI-MS 条件优化34-38

    3.3.2 痰液的 ND-EESI-MS 的谱图浅析38-42

    3.3.3 痰液的 ND-EESI-MS 谱图的主成分浅析42-43

    3.4 小结43-45

    第四章 尖端电喷雾萃取电离质谱技术在组织样品浅析中的运用45-53

    4.1 引言45

    4.2 实验部分45-46

    4.2.1 仪器与试剂45

    4.2.2 质谱条件45-46

    4.3 结果与讨论46-51

    4.3.1 组织样品的 Tip-Spray-MS 的谱图浅析46-49

    4.3.2 组织样品的高通量浅析49-50

    4.3.3 组织样品的 Tip-Spray-MS 谱图的主成分浅析50-51

    4.4 小结51-53

    第五章 内部电喷雾萃取电离质谱策略的建立及其在组织样品浅析中的运用53-69

    5.1 引言53

    5.2 实验部分53-54

    5.2.1 仪器与试剂53

    5.2.2 质谱条件53-54

    5.3 结果与讨论54-67

    5.3.1 内部电喷雾萃取电离质谱法的建立54-55

    5.3.1.1 Internal EESI-MS 建立背景54

    5.3.1.2 Internal EESI-MS 技术结构与原理54-55

    5.3.2 内部电喷雾萃取电离技术的机理探讨55-61

    5.3.2.1 琼脂中肌酐及口香糖的常压质谱浅析55-58

    5.3.2.2 C18 柱的 Internal EESI 谱图浅析58-60

    5.3.2.3 不同极性 ESI 萃取溶剂对 Internal EESI 的影响60-61

    5.3.3 内部电喷雾萃取电离质谱法在组织样品浅析中的运用61-67

    5.3.3.1 大蒜叶子的常压质谱浅析61-63

    5.3.3.2 猪肉组织样品的常压质谱浅析63-65

    5.3.3.3 肺组织样品的 Internal EESI 谱图浅析65-67

    5.4 小结67-69

    第六章 结论69-71

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