对于免疫胰腺癌患者外周血Toll样受体4和CD4~+CD25~+调节性T细胞变化与临床作用

摘要：目的：检测胰腺癌患者和健康对照者外周血中单个核细胞（peripheral bloodmononuclear cells, PBMCs）表面Toll样受体（Toll-pke receptor, TLR）4的表达，以及CD4~+CD25~+调节性T细胞（regulatory T cells, Treg）与CD4~+细胞的比例，探讨TLR4在胰腺癌患者外周血免疫细胞表面表达的临床作用，为胰腺癌的临床治疗提供一定的论述基础。策略：收集胰腺癌患者和健康对照者的外周血标本，运用密度梯度离心法分离PBMC，采取实时荧光定量PCR检测PBMC中TLR4mRNA的水平，运用流式细胞仪检测PBMC中Treg细胞/CD4~+细胞比例，SPSS15.0统计软件浅析所得数据。结果：运用实时荧光定量PCR和流式细胞技术发现，胰腺癌患者PBMC表面TLR4mRNA的表达量和Treg/CD4~+比例均显著高于健康对照者，并且不同TNM分期胰腺癌患者PBMC中TLR4mRNA的表达量和Treg/CD4~+比例的有显著差别，具有统计学作用（p0.05）。经相关性浅析得出，TLR4mRNA表达量与Treg/CD4~+比例呈正相关（r=0.673,P=0.021）。结论：胰腺癌患者外周血中单个核细胞表面TLR4的激活降低了机体免疫功能，以而推动肿瘤免疫逃逸和免疫耐受。通过对TLR信号通路进行干预，可能为胰腺癌的肿瘤免疫治疗提供新的方向。关键词：Toll样受体论文调节性T细胞论文胰腺癌论文免疫抑制论文肿瘤免疫治疗论文

摘要6-8

Abstract8-10

前言10-12

1 实验材料12-14

1.1 主要材料与试剂12

1.2 主要仪器与设备12-14

2 实验策略14-18

2.1 标本收集14

2.2 外周血单个核细胞的提取14

2.3 RNA 的提取14-15

2.4 实时荧光定量 PCR 检测 TLR4mRNA 的表达15-16

2.5 流式细胞仪检测 Treg 细胞16-17

2.6 统计学策略17-18

3 实验结果18-20

3.1 基本资料18

3.2 胰腺癌患者与健康对照者 TLR4mRNA 表达量的比较18

3.3 胰腺癌患者与健康对照者 Treg/CD4~+比例的比较18

3.4 不同 TNM 分期胰腺癌患者 TLR4mRNA 表达量的区别18-19

3.5 不同 TNM 分期胰腺癌患者 Treg/CD4~+比例的区别19

3.6 TLR4mRNA 与 Treg 细胞的相关性浅析19-20

4 讨论20-23

5 附图表23-27