核苷酸转基因食品基因芯片检测与鉴定策略建立

中文摘要6-7

Abstract7-9

第一章 转基因技术运用及其产品检测策略探讨进展9-23

1.1 转基因技术运用9-11

1.1.1 转基因技术在农业生产上的运用9-11

1.1.2 转基因技术在食品工业上的运用11

1.2 不同国家转基因食品标识制度比较11-13

1.3 转基因检测常用策略13-18

1.3.1 蛋白检测法13-14

1.3.2 核酸检测策略14-18

1.4 我国转基因植物及其产品成分检测流程18-19

1.5 试验中所用材料的背景介绍19-23

1.5.1 转基因玉米 MIR16219-20

1.5.2 转基因玉米 MON8801720

1.5.3 转基因玉米 BVLA43010120-21

1.5.4 转基因大豆 MON8978821-22

1.5.5 转基因大豆 GTS40-3-222

1.5.6 转基因油菜 MS1 与 RF122-23

第二章 定性 PCR 检测策略的建立23-35

2.1 前言23

2.2 材料与策略23-25

2.2.1 材料23

2.2.2 试验试剂23-24

2.2.3 主要实验仪器24

2.2.4 样品 DNA 提取24-25

2.2.5 转化体特异性引物设计25

2.2.6 定性 PCR 系统的条件优化25

2.2.7 PCR 产物浅析25

2.3 结果与浅析25-33

2.3.1 DNA 提取结果验证25-26

2.3.2 PCR 扩增引物26-27

2.3.3 PCR 反应条件优化结果27

2.3.4 转化体特异性定性 PCR 结果27-32

2.3.5 转基因玉米 MIR162 定性检测标准化32-33

2.4 讨论33-34

2.5 致谢34-35

第三章 基因芯片检测策略探讨35-48

3.1 前言35-36

3.2 材料与策略36-38

3.2.1 材料36

3.2.2 主要试剂与仪器36

3.2.3 样品 DNA 提取36

3.2.4 引物设计36

3.2.5 Opgo 探针设计36

3.2.6 芯片制备36-37

3.2.7 PCR 扩增37

3.2.8 杂交和信号检测37-38

3.3 结果与浅析38-46

3.3.1 探针设计38

3.3.2 杂交阳性与阴性的判定38-39

3.3.3 芯片检测特异性验证39-45

3.3.4 基因芯片灵敏度验证45-46

3.4 讨论46-48

第四章 复合 PCR-基因芯片联用检测策略48-54

4.1 引言48

4.2 材料与策略48-49

4.2.1 材料48

4.2.2 主要试剂与仪器48

4.2.3 DNA 提取与制备48-49

4.2.4 引物和探针设计49

4.2.5 芯片制备49

4.2.6 复合 PCR 扩增49

4.2.7 杂交和信号检测49

4.3 结果与浅析49-52

4.3.1 MIR162、MON89788、18S rRNA 三重 PCR 反应系统的建立及优化49-50

4.3.2 MIR162、MON88017、MON89788、18S rRNA 四重 PCR 反应系统的建立及优化50-51

4.3.3 MON88017、MS1、RF1、18S rRNA 四重 PCR 反应系统的建立及优化51-52

4.4 讨论52-54

第五章 结论54-55