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摘要：普鲁兰糖(pullulan)是出芽短梗霉在发酵中产生的次级代谢产物,是一种由a.(1.6)糖苷键连接麦芽三糖构成的线性分子,也是一种有广阔用途前景的多聚糖。本试验以野生菌株A.pullulan NG为出发菌株,YND液体培养到一定浓度后紫外照射,存活率曲线最佳诱变照射时间为2.0min,经过3轮紫外诱变了一株无色素高产糖突变菌株UVMU3-1.对比分析突变菌株和野生菌株的细胞形态结果：突变菌株UVMU3-1细胞多形性突变,在pH 4.5时膨大分化率与野生菌株相差不大。液体PDA发酵96h,UVMU3-1生长曲线表征的生长规律与野生菌株一致；在PDA、YAD和YPD中的摇瓶培养时的生物量干重,粗多糖产量和单位菌体产糖量与野生菌株相差不大。以YAD为培养基,用控制pH的发酵罐(10L)发酵时,其生物量干重与野生菌株相差不大,但是突变菌体的多糖产量是野生菌株的1.6倍,单位菌体产糖量是野生菌株的1.65倍,糖转化率是野生菌株的1.59倍。突变菌株UVMU3-1产出的多糖经过红外光谱鉴定发现多糖性质发生改变,确定其仍为pullulan.响应面法优化突变菌株UVMU3-1摇瓶发酵试验的培养基。PB实验葡萄糖和磷酸二氢钾为主效影响因子,且为正效应；硝酸钠、酵母粉和吐温-80为正效影响因子；硫酸铵和硫酸镁为负效影响因子。最陡爬坡试验结果当葡萄糖为65g/L、磷酸二氢钾为5.01g/L时,突变菌株UVMU3-1产糖量最大,可达到18.01g/L。以最陡爬坡试验的最佳值为中心点,设计2因素5的中心组合试验优化培养基,预测当葡萄糖为67g/L,磷酸二氢钾5.18g/L,可产糖量的最大响应值为19.765g/L。优化培养基实验的产糖量为19.975g/L,与预测结果相。在摇瓶发酵优化的基础上,发酵罐发酵试验,发现控制pH条件可更高的产糖量(30.43g/L),糖转化率可达45.42%。罐发酵试验结果粗多糖产量、单位菌体产糖量和糖转化率都高于摇瓶发酵。突变菌株UVMU3-1具有工业化生产菌株的潜力。关键词：紫外诱变论文突变菌株论文普鲁兰糖论文响应面论文培养基优化论文
摘要8-9
Abstract9-10
前言10-27
1 普鲁兰糖研究概况11-15
1.1 普鲁兰糖分子结构11
1.2 普鲁兰糖的理化性质11-12
1.3 普鲁兰糖合成机理12-15
2 普鲁兰糖研究进展15-23
2.1 现有产普鲁兰糖菌株15-16
2.2 国内外研究现状16-18
2.3 出芽短梗霉的菌种选育18-19
2.4 影响菌株产糖的因素19-22
2.5 普鲁兰糖工业生产存在的问题22-23
3 普鲁兰糖的应用23-25
3.1 普鲁兰糖在食品的应用23-24
3.2 普鲁兰糖在化工的应用24
3.3 普鲁兰糖在医药的应用24-25
3.4 普鲁兰糖在环境的应用25
4 普鲁兰糖衍生物的研究25-26
5 本课题研究的主要内容26-27
章 普鲁兰糖无色素高产突变菌株的诱变筛选27-36
1.1 与方法28-30
1.1.1 试验28-29
1.1.2 试验方法29-30
1.2 试验结果30-34
1.2.1 致死率检测结果及分析30-31
1.2.2 突变菌株与野生型比较31-34
1.3 小结34-36
章 无色素突变菌株产糖培养基的优化36-46
2.1 与方法36-39
2.1.1 试材36-37
2.1.2 试验方法37-39
2.2 试验结果39-44
2.2.1 产普鲁兰糖主要影响因素的确定40-41
2.2.2 最陡爬坡试验结果分析41
2.2.3 中心组合试验结果分析41-42
2.2.4 响应面交互作用分析及优化42-44
2.2.5 罐发酵试验44
2.3 小结44-46
章 与讨论46-48
3.1 46-47
3.2 讨论47-48