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摘要：研究益气活血中药对大鼠血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、内皮素-1(ET-1)、γ-干扰素(γ-IFN)四种因子的影响,免疫组织化学检测TGF-β_1、TNF-α二种蛋白在肺组织中的表达,明确益气活血方药防治放射性肺损伤的作用机制。应用基因芯片技术初步筛选放射性肺损伤发生易感基因,以期阐明放射性肺损伤发病机制。观察益气活血中药对放射性肺损伤基因表达的影响,为防治放射性肺损伤的中医药临床应用依据。健康成年Wistar大鼠70只,雌雄各半,分笼饲养。在SPF级实验室正常饲养3天后实验。按3:3:1随机分为照射加中药组30只(A组)、单纯照射组30只(B组)、对照组10只(C组)。A、B二组大鼠均6MV-X直线加速器照射右肺,照射前使用钠0.04g.Kg-1腹腔麻醉,俯卧于平台,模拟机下定位,铅块遮挡左肺及纵隔,照射野面积3cm×3cm,每次5Gy,每周一次,总量30Gy,照射后大鼠自然清醒。C组大鼠只麻醉,不予照射。于受照当天开始给药,A组每日灌胃益气活血中药1mL,B、C组每日灌胃1mL蒸馏水。A、B二组于首次照射后第4、6、8、12、26周末,各随机抽取6只大鼠,腹腔麻醉后立即处死。C组于第4周末处死6只大鼠、于6、12周末分别处死2只大鼠做对照。大鼠处死后,取血清标本用酶联免疫吸附法(ELISA)检测,取右肺组织标本免疫组织化学检测,取6、12周末右肺组织基因芯片检测。检测各组不同时相血清中TGF-β1、TNF-α、ET-1、γ-IFN四种因子的变化,观察肺组织中TGF-β1、TNF-α蛋白表达的动态变化。1. A、B、C三组血清中TGF-β_1、TNF-α、ET-1因子,于照射后第4周升高,第12周达高峰,第26周略下降;A组各时相TGF-β1、TNF-α、ET-1蛋白表达均低于B组(P0.05),而γ-IFN在第4周开始降低,第12周下降加快,至26周逐渐恢复。A组各时相大鼠血清中γ-IFN表达均高于B组(P0.05)。2.肺组织中TGF-β1、TNF-α蛋白表达强度:A组、B组自第4周阳性细胞反应物质的平均IOD值开始增高并高于正常对照组,到第12周达高峰,26周下降,但A组在各时间点平均光密度值(IOD)值均低于B组(P0.05)。3. 6周末B组与C组比较,差异表达基因中筛选出上调基因669个,下调基因381个。12周末处死的B组与C组比较,差异表达基因中筛选出上调基因833个,下调基因1217个。与放射性肺损伤的上调基因主要有CTHRC、EDN1、IGF1、RAD、Bcl-2、MDM2、XRCC5、ERCC5;下调基因主要有FGFR3、ERO1L、UNC5B、STK4、ATRX、TP53、NFKB、FAS。4. 6周末A组与B组大鼠对比,差异表达基因中筛选出上调基因936个,下调基因752个。12周末处死的A组与B组大鼠对比,筛选出上调基因169个,下调基因183个。益气活血中药对放射性肺损伤基因CTHRC、FGFR3、EDN1、ERO1L具有一定的调控作用。益气活血中药抑制TGF-β1、TNF-α、ET-1的表达,促进γ-IFN分泌,具有减轻早期放射性炎症反应和后期放射性肺纤维化的作用,对放射性肺损伤的防治具有较好作用。CTHRC1、FGFR3、EDN1、ERO1L等基因可能与放射性肺损伤的发生密切。益气活血中药可能调控放射性肺损伤基因CTHRC1、FGFR3、EDN1、ERO1L的表达,起到防治放射性肺损伤的作用。关键词：益气活血中药论文放射性肺损伤论文免疫组化论文细胞因子论文基因芯片论文
中文摘要4-6
英文摘要6-9
前言9-11
与方法11-15
结果15-18
附图18-37
附表37-42
讨论42-49
49-50