探究茯苓羧茯苓多糖脂质体制备与其包封率测定科技

[摘要] 目的 制备羧茯苓多糖脂质体，并测定羧茯苓多糖脂质体的含量和包封率，初步探讨最佳包封的药量。 方法 采用薄膜分散法制备羧茯苓多糖脂质体，离心分离法测定羧茯苓多糖脂质体的包封率。 结果 离心法所得羧茯苓多糖脂质体检测浓度线性范围为1～100 mg/L。羧茯苓多糖脂质体的最佳包封的药量为50 mg/L，包封率为37.99%。 结论 羧茯苓多糖脂质体的制备需要分别处理，不同浓度的羧茯苓多糖脂质体有不同的包封率，测定过程中需按要求进行，明确最佳包封药量。
[关键词] 脂质体；羧茯苓多糖；包封率；离心法
[] A [文章编号] 1673-7210（2013）01（c）-0130-03
羧茯苓多糖（CMP）系多孔菌真菌茯苓中β-茯苓聚糖的衍生物，具有增强免疫、抗肿瘤、抗病毒、抗放射、保肝、抗衰老、镇静等作用，目前临床上已应用的剂型主要有口服液、胶囊、片剂等。CMP在人体内的半衰期比较短，因此作为一种具有免疫调节作用的抗肿瘤辅助药物，在临床上的应用受到明显的限制。笔者将羧茯苓多糖制备成脂质体，旨在利用脂质具有靶向性和淋巴定向性、缓释性、细胞亲和性与组织相容性、降低药物毒性、保护药物提高稳定性等特点，从而改变药物在体内的分布，延缓药物在体内的释放，降低药物的毒性[1-5]。羧茯苓多糖脂质体的不断发展，可以为临床抗肿瘤治疗提供更加方便、有效的新剂型，具有巨大的市场潜力，可以创造良好的社会效益和经济效益。

1 仪器与试剂

1.1 仪器

旋转蒸发仪（郑州长城科工贸有限公司），SHZ-D（Ⅲ）循环水式真空泵（巩义市予华仪器有限责任公司），烧瓶，容量瓶，恒温水浴锅（郑州长城科工贸有限公司），DW-2型多功能电动搅拌机（巩义市予华仪器有限责任公司），紫外分光光度仪（日本岛津制造UV-2450），800型电动离心机（江苏金坛市金城国胜实验仪器厂），电子天平，烧瓶，容量瓶。

2.2 试药

羧茯苓多糖，大豆卵磷脂（江苏曼氏生物科技有限公司），胆固醇（南京新百药业有限公司），无水（分析纯，天津市科密欧化学试剂有限公司），磷酸氢二钠，磷酸二氢钠。

2 方法与结果

2.1 实验制备方法

2.

1.1 实验处方

本组研究中，一共选择6种不同的处方作为研究对象：①将1.5 g大豆磷脂、0.5 g胆固醇以及10 mL无水加入到1 mg/L的CMP溶液50 mL中，制成50 mL的脂质体。②将1.5 g大豆磷脂、0.5 g胆固醇以及10 mL无水加入到10 mg/L的CMP溶液50 mL中，制成50 mL的脂质体。③将1.5 g大豆磷脂、0.5 g胆固醇以及10 mL无水加入到20 mg/L的CMP溶液50 mL中，制成50 mL的脂质体。④将1.5 g大豆磷脂、0.5 g胆固醇以及10 mL无水加入到50 mg/L的CMP溶液50 mL中，制成50 mL的脂质体。⑤将1.5 g大豆磷脂、0.5 g胆固醇以及10 mL无水加入到100 mg/L的CMP溶液50 mL中，制成50 mL的脂质体。⑥将1.5 g大豆磷脂、0.5 g胆固醇以及10 mL无水加入到50 mL磷酸盐（PBS）缓冲液中，制成50 mL的脂质体。
2.

1.2 磷酸盐缓冲液（PBS）的制备

称取磷酸氢二钠（Na2HPO4）5.59 g与磷酸二氢钠（NaH2PO4）0.41 g，加蒸馏水适量，溶解并稀释至1 000 mL（pH约为

7.8），摇匀[6]。

2.

1.3 空白脂质体的制备

2.1.3.1 称取处方量磷脂，胆固醇，至于100 mL烧瓶中，加无水10 mL，55℃水浴中，搅拌使溶解，于旋转蒸发仪上旋转，使磷脂的在壁上成膜，除去，制备磷脂膜[7]。
2.1.3.2 另取磷酸缓冲液50 mL至于小烧杯内，同置于55℃

摘自：毕业论文如何写www.udooo.com

水浴中，保温，待用[8]。
2.1.3.3 取预热的磷酸盐缓冲液50 mL，加至含有磷脂膜的烧瓶中，转动下，55℃水浴中水化10～20 min。取出脂质体液体于烧杯内，置于磁力搅拌器上，室温，搅拌30～60 min，混匀，即得[9]。
2.

1.4 含药脂质体的制备

2.1.4.1 称取适量的羧茯苓多糖，用磷酸缓冲液分别配成

1、10、20、50、100 mg/mL的5种浓度的溶液来配制羧茯苓多糖溶液。

2.1.4.2 称取处方量磷脂，胆固醇，至于100 mL烧瓶中，加无水10 mL，55℃水浴中，搅拌使溶解，于旋转蒸发仪上旋转，使磷脂的在壁上成膜，除去，制备磷脂膜。
2.1.4.3 另取羧茯苓多糖溶液50 mL（1 mg/mL）置于小烧杯内，同置于55℃水浴中，保温，待用。
2.1.4.4 取预热的液羧茯苓多糖溶液50 mL，加至含有磷脂膜的烧瓶中，转动下，55℃水浴中水化10～20 min。取出脂质体液体于烧杯内，置于电动搅拌器上，室温，搅拌30～60 min，混匀，即得。
2.1.4.5 按照上面的方法依次制备浓度为10、20、50、100 mg/mL的羧茯苓多糖溶液的脂质体。

2.2 羧茯苓多糖脂质体含量测定的方法

2.1 羧茯苓多糖溶液的配制

精确称取羧茯苓多糖0.1 g，加入到100 mL的量瓶中，加二次蒸馏水至刻度，定容摇匀，配制成1 g/L的羧茯苓多糖溶液，待用。

2.2 测定波长的选择

用移液管吸取5 mL的1 g/L的CMP溶液于50 mL的容量瓶中配制成100 mg/L的CMP溶液。精密量取该溶液2 mL，置20 mL具塞试管中，分别加入80%的苯酚溶液50 μL以及浓硫酸5 mL，摇匀，静置10 min，置于25～30℃的水浴中保温20 min。以2 mL二次蒸馏水代替CMP溶液，同法所得为空白溶液。绘制450～250 nm的吸收曲线。CMP的最大吸收波长为298 nm。

摘自：毕业论文格式设置www.udooo.com