摘要5-6
ABSTRACT6-9
1 前言9-25
1.1 肿瘤9-11
1.1.1 肿瘤及其危害9-10
1.1.2 肝癌对人类的威胁10
1.1.3 肿瘤的治疗10-11
1.2 凋亡11-18
1.2.1 凋亡探讨历史和概念11-12
1.2.3 凋亡途径12-14
1.2.4 凋亡蛋白14-15
1.2.5 线粒体氧化在凋亡中的作用15-17
1.2.6 凋亡在肿瘤中的运用17-18
1.3 家蝇18-20
1.3.1 家蝇幼虫的营养价值19
1.3.2 家蝇幼虫的用途与开发19-20
1.4 凝集素20-24
1.4.1 凝集素的概念20
1.4.2 凝集素的分布20-22
1.4.3 凝集素的功能与运用22-24
1.5 本课题的探讨作用及探讨内容24-25
2 材料与策略25-44
2.1 实验材料25-29
2.1.1 实验动物与肿瘤细胞株25
2.1.2 主要药品25-27
2.1.3 仪器与设备27-29
2.1.4 液体与实验动物处理29
2.2 实验策略29-44
2.2.1 家蝇的饲养29-30
2.2.2 凝集素的制备30-31
2.2.3 凝集素纯度和分子量的测定31-32
2.2.4 家蝇幼虫凝集素凝血活性的探讨32-33
2.2.5 肿瘤细胞体外增殖抑制33-34
2.2.6 凝集素抗肿瘤形态学观察34-35
2.2.7 乳酸脱氢酶LDH释放率35
2.2.8 细胞内生理变化35-37
2.2.9 流式细胞术(FCM)浅析细胞周期阻断与凋亡37
2.2.10 流式细胞术(FCM)浅析线粒体势能变化37-38
2.2.11 免疫印迹检测蛋白表达变化38-40
2.2.12 荷瘤小鼠建立分组及给药40
2.2.13 免疫指数的测定40-41
2.2.14 乳酸脱氢酶(LDH)测肝肾组织损伤41
2.2.15 凝集素对于腹水细胞的细胞形态学观察41-42
2.2.16 半定量RT-PCR法检测小鼠免疫指标42-43
2.2.17 数据处理43-44
3 结果与讨论44-65
3.1 家蝇幼虫凝集素的分离纯化44-45
3.1.1 凝集素亲和层析44-45
3.1.2 凝集素的电泳鉴定45
3.2 凝集素的凝血性质鉴定45-46
3.3 家蝇幼虫凝集素的体外抗肿瘤活性探讨46-58
3.3.1 肿瘤细胞活性抑制实验46-47
3.3.2 细胞形态学观察实验47-48
3.3.3 流式细胞仪FCM检测细胞周期结果48
3.3.4 细胞内一氧化氮变化48-50
3.3.5 线粒体氧化以及势能变化50-53
3.3.6 乳酸脱氢酶LDH释放率53-54
3.3.7 免疫印迹浅析检测蛋白变化54-58
3.4 家蝇幼虫凝集素的体内抗肿瘤活性探讨58-65
3.4.1 小鼠免疫功能影响58-61
3.4.2 肝肾损伤情况61
3.4.3 对小鼠腹水细胞的影响61-65
4 结论65-66
5 展望66-67
6 参考文献67-77
7 攻读硕士学位期间论文发表情况77-78
8 致谢78