简述聚乙二醇修饰对牛乳β乳球蛋白致敏性和构象变化设计

摘要3-4

ABSTRACT4-10

第一章 前言10-23

1.1 聚乙二醇修饰技术的国内外探讨近况10-15

1.1.1 聚乙二醇修饰蛋白质10-13

1.1.2 聚乙二醇修饰技术的运用13-15

1.2 β-乳球蛋白的探讨近况15-21

1.2.1 牛乳过敏15-16

1.2.2 β-乳球蛋白介绍16-17

1.2.3 牛乳蛋白致敏机理17-18

1.2.4 致敏原在食品加工历程中的探讨进展18-21

1.3 本课题的选题作用、探讨内容和革新点21-23

1.3.1 选题作用21

1.3.2 探讨内容21-22

1.3.3 革新点22-23

第二章 兔抗牛乳β-乳球蛋白多克隆抗体的制备23-29

2.1 引言23

2.2 实验材料和设备23-25

2.2.1 实验材料23-24

2.2.2 实验仪器与设备24

2.2.3 溶液配制24-25

2.3 实验策略25-27

2.3.1 试验动物25-26

2.3.2 制备抗原26

2.3.3 免疫案例26

2.3.4 分离血清26-27

2.3.5 多抗效价的测定27

2.4 结果与讨论27-28

2.4.1 抗体效价变化27-28

2.4.2 多抗的制备28

2.5 本章小结28-29

第三章 聚乙二醇修饰对牛乳β-乳球蛋白抗原性的影响29-41

3.1 引言29

3.2 实验材料和设备29-33

3.2.1 实验材料29-30

3.2.2 实验仪器与设备30

3.2.3 溶液的配制30-33

3.3 实验策略33-36

3.3.1 mPEG-SC修饰β-Lg33

3.3.2 间接竞争ELISA测定修饰产物的抗原性33-34

3.3.3 TNBS法测定修饰度34

3.3.4 SDS-PAGE测定修饰产物34-35

3.3.5 数据浅析35-36

3.4 结果与讨论36-39

3.4.1 PEG修饰β-Lg产物的抗原性36-38

3.4.2 修饰条件对修饰度的影响38-39

3.4.3 PEG修饰对β-Lg相对分子质量的影响39

3.5 本章小结39-41

第四章 聚乙二醇修饰β-乳球蛋白产物的纯化41-48

4.1 引言41

4.2 实验材料和设备41-44

4.2.1 实验材料和试剂41-42

4.2.2 实验设备42

4.2.3 溶液的配制42-44

4.3 实验策略44-45

4.3.1 PEG修饰β-乳球蛋白44

4.3.2 离子交换层析法分离纯化修饰产物44

4.3.3 SDS-PAGE检测分离蛋白44-45

4.4 结果与讨论45-47

4.4.1 阳离子交换层析分离纯化修饰产物45-46

4.4.2 SDS-PAGE测定分离蛋白46-47

4.5 本章小结47-48

第五章 PEG修饰对β-乳球蛋白构象的影响48-54

5.1 引言48

5.2 实验材料和设备48-49

5.2.1 实验材料和试剂48-49

5.2.2 实验设备49

5.3 PEG-β-乳球蛋白构象浅析49-50

5.3.1 荧光光谱浅析49

5.3.2 圆二色谱浅析49-50

5.4 结果与讨论50-52

5.4.1 PEG修饰对β-乳球蛋白荧光光谱的影响50-51

5.4.2 PEG修饰对β-乳球蛋白圆二色谱的影响51-52

5.5 本章小结52-54

第六章 结论与展望54-56

6.1 主要结论54-55

6.1.1 PEG修饰对β-乳球蛋白抗原性的浅析结果54

6.1.2 PEG修饰β-乳球蛋白产物纯化的探讨结果54-55

6.1.3 PEG修饰对β-乳球蛋白构象影响的探讨结果55

6.2 进一步展望55-56

致谢56-57