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加压心肺脑复苏后大鼠JNK、P38MAPK、NFKB变化和药物治疗结论

收藏本文 2024-01-14 点赞:10907 浏览:38413 作者:网友投稿原创标记本站原创

摘要:目的:探讨血管加压素对心肺脑复苏大鼠海马区JNK、P38MAPK、NF-kB以及casepase-3的影响。比较肾上腺素、血管加压素、以及联合用药组对大鼠心肺脑复苏的疗效。策略:将250只Wistar大鼠(雌雄不限)随机分为5组(n=50只/组),分别为:1、检测手术组:只进行插管,不造成窒息,不进行心肺复苏。2、对照组:窒息导致心脏骤停,常规给予其心肺复苏,给予生理盐水1ml。3、肾上腺素组:做窒息模型,常规体外心肺复苏,复苏时给予其等容量的肾上腺素0.2mg/Kg。4、血管加压素:做窒息模型,常规体外心肺复苏,复苏时给予其等容量血管加压素0.8U/Kg,余同肾上腺组。5、联合用药组:做窒息模型,常规体外心肺复苏,复苏时给予肾上腺素0.2mg/kg+血管加压素0.8U/kg,等剂量。因对照组大鼠复苏后成活概率极低,所以除对照组外,其余各组复苏成功大鼠于1、3、6、12小时处死,留取大脑海马区,通过免疫组化策略检测大鼠海马内P38、JNK、caspase-3、NF-KB的表达。并计算各组大鼠自主循环恢复率、大脑海马区病理学变化。结果:1、血管加压素组、肾上腺素组及联合用药组复苏成功数值比较分别为39/50,24/50,42/50,肾上腺素组与联合组复苏自主循环恢率比较,差别有统计学作用(p<0.05),联合用药组与血管加压素比较,差别无统计学作用(p>0.05)。2、联合用药组与血管加压联合用药组素脑组织海马区中的JNK、P38、caspase-3、NF-KB免疫组化评分显著低于肾上腺素组,且差别有统计学作用(p<0.05),联合用药组、血管加压素两组比较差别无统计学作用(p>0.05)。3、在HE染色后,光镜观察病理学结果,肾上腺素组、血管加压素组、联合用药组较正常组有神经元凋亡的增加及神经元水肿,三组之间比较形态学差别不显著。但在电镜超微结构下可见,比起血管加压素组和联合用药组,运用肾上腺素组的大鼠神经细胞变性更严重,水肿更显著,线粒体损伤严重。而联合用药组和单用血管加压素组两者损伤相对较轻,且两组间差别不显著。结论:除对照组与检测手术组外,联合用药组自主循环恢复率与肾上腺素比较,差别有统计学作用(p<0.05),联合用药组与血管加压素组比较差别不显著(p>0.05)。通过形态学及免疫组化结果浅析,联合用药组及血管加压素组更能够增加脑部血液灌流,减少神经元凋亡,能够抑制MAPK信号通路以及NF-kB信号通路的激活,减轻缺血再灌注损伤。关键词:血管加压素论文心肺脑复苏论文JNK论文P38MAPK论文NF-KB论文

    摘要4-6

    Abstract6-12

    第1章 绪论12-15

    第2章 文献综述15-21

    2.1 血管加压素的作用机制探讨15-17

    2.2 血管加压素运用于临床进展17-18

    2.3 血管加压素运用于动物实验18

    2.4 血管加压素与不同药物联合运用18-20

    2.5 结语20-21

    第3章 实验材料21-23

    3.1 实验动物21

    3.2 试剂及仪器21-23

    3.2.1 试剂21

    3.2.2 仪器21-23

    第4章 实验策略23-28

    4.1 实验动物的分组策略23

    4.2 实验动物模型的制作23

    4.3 复苏及给药策略23-24

    4.4 判定标准24

    4.5 标本处理24-25

    4.6 实验步骤25-28

    4.6.1 免疫组化测 JNK、P38、caspase-3、NF-KB25-26

    4.6.2 石蜡切片苏木紫—伊红染色法的基本步骤(HE 染色)26-27

    4.6.3 免疫组化结果判读27

    4.6.4 统计学策略27-28

    第5章 实验结果28-46

    5.1 复苏前各组大鼠基本参数比较28

    5.2 ROSC 成功率的比较28-29

    5.3 ROSC 恢复的大鼠所需时间及用药次数的比较29

    5.4 脑组织病理结果29-32

    5.4.1 大鼠脑组织海马区光镜下病理变化29-31

    5.4.2 大鼠脑组织电镜形态学结果31-32

    5.5 大鼠脑组织海马区免疫组化 S-P 法及评分32-46

    5.5.1 大鼠海马区 caspase-3 免疫组化染色32-35

    5.5.2 大鼠海马区 caspase-3 免疫组化评分35-36

    5.5.3 大鼠海马区 JNK 免疫组化染色36-38

    5.5.4 大鼠海马区 JNK 免疫组化评分38-39

    5.5.5 大鼠海马区 P38 免疫组化染色39-41

    5.5.6 大鼠海马区 P38 免疫组化评分41-42

    5.5.7 大鼠海马区 NF-kBp65 免疫组化染色42-44

    5.5.8 大鼠海马区 NF-kBp65 免疫组化评分44-46

    第6章 讨论46-49

    第7章 结论49-50

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