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摘要：目的:本实验体外细胞培养技术和分子生物学技术,以人鼻咽低分化鳞癌细胞系5-8F为研究对象,探讨d-δ-三烯生育酚对鼻咽癌细胞的增殖、周期和凋亡的影响,分析d-δ-三烯生育酚对鼻咽癌细胞生物学恶性表型的分子Bax、Bcl-2表达的影响,探讨d-δ-三烯生育酚抗鼻咽癌的生物学活性,为d-δ-三烯生育酚抗鼻咽癌的应用初步实验与实验依据。方法:细胞的体外培养,实验设对照组与观察组,对照组不用d-δ-三烯生育酚干预,观察组用40、50、60μmol/l的d-δ-三烯生育酚干预。(1)、细胞形态学检测: d-δ-三烯生育酚干预鼻咽癌5-8F细胞系48h后,在倒置显微镜下观察细胞的形态;Hoechst33258染料处理细胞后,置荧光显微镜下观察细胞的凋亡。(2)、d-δ-三烯生育酚干预鼻咽癌5-8F细胞系48h后,应用MTT实验检测5-8F细胞的增殖。(3)、d-δ-三烯生育酚干预鼻咽癌5-8F细胞系48h后,流式细胞仪检测细胞凋亡的改变。(4)、d-δ-三烯生育酚干预鼻咽癌5-8F细胞系48h后,流式细胞仪检测细胞周期的变化。(5)、d-δ-三烯生育酚干预鼻咽癌5-8F细胞系48h后,Western-blot检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达。结果:(1)、d-δ-三烯生育酚处理5-8F细胞48h后,随浓度增加,镜下观察发现贴壁活细胞数目减少,漂浮的死亡细胞数目增多,核荧光强染色细胞比例增多,细胞生长出现的抑制和凋亡现象。(2)、细胞增殖分析揭示,观察组细胞的生长抑制率分别为(46.03±4.16)%、(67.68±3.12)%、(95.05±0.10)%,与对照组抑制率为0比较,p0.01,差别具有。(3)、细胞凋亡分析发现,观察组细胞凋亡率分别为(2.60±0.30)%、(7.54±1.01)%、(21.17±0.81)%,与对照组细胞凋亡率(0.83±0.12)比较,p0.01,差别具有。(4)、观察组S期细胞百分率分别为(27.67±1.67)%、(31.37±1.30)%、(33.00±0.70)%,与对照组S期细胞百分率为(16.33±0.15)%比较,p0.01,差异有,细胞阻滞于S期。(5)、与对照组比较,观察组Bax蛋白表达增加、Bcl-2蛋白表达降低,呈浓度依耐性。:d-δ-三烯生育酚能抑制5-8F细胞的增殖,诱导其凋亡,阻滞细胞于S期,其机制可能与诱导Bax表达、抑制Bcl-2表达等凋亡调控基因有关,具有潜在的抗鼻咽癌生物学活性。关键词：d-δ-三烯生育酚论文鼻咽癌论文增殖论文周期论文凋亡论文
摘要4-6
ABSTRACT6-9
英汉缩略词对照表9-10
前言10-13
1 与方法13-23
1.1 实验与仪器13-15
1.2 实验方法15-23
2 结果23-29
3 讨论29-34
4 34-35