白细胞重组hIL24联合顺铂对子宫内膜癌HEC1B细胞株生长影响

摘要：目的：用重组人白细胞介素-24(rhIL-24)联合顺铂(DDP)抑制子宫内膜癌HEC-1B细胞株的探讨,探讨体外用药的有效剂量,进行抗肿瘤机制的探讨,为临床运用rhIL-24联合顺铂治疗子宫内膜癌提供论述指导。策略：(1)将100μl浓度为2×104个细胞/ml的HEC-1B细胞和2×104个细胞/ml的WI-38细胞分别加入96孔板,在37℃、5%CO2及饱和湿度条件下的CO2培养箱中培养,细胞完全贴壁生长后,分别加入浓度为80ng/ml、100ng/ml、120ng/ml、150ng/ml、200ng/ml的rhIL-24和浓度为5μg/ml、10μg/ml、25μg/ml、50μg/ml、75μg/ml的DDP,在同样条件下继续培养24h、48h、72h,以CCK-8法分别检测细胞生长抑制率(2)将100μl浓度为2×104个细胞/ml的HEC-1B细胞和2×104个细胞/ml的WI-38细胞分别加入96孔板,在37℃、5%CO2及饱和湿度条件下的CO2培养箱中培养,细胞完全贴壁生长后,加入120ng/ml的rhIL-24联合10μg/ml的DDP,分别在24h、48h、72h,以CCK-8法检测细胞生长联合作用抑制率(3)将100μl浓度为2×104个细胞/ml的HEC-1B细胞和2×104个细胞/ml的WI-38细胞分别加入50ml培养瓶中,在37℃、5%CO2及饱和湿度条件下的CO2培养箱中培养,细胞完全贴壁生长后,分别加入120ng/ml的rhIL-24,10μg/ml的DDP,120ng/ml的rhIL-24联合10μg/ml的DDP,培养24h,以流式细胞仪检测细胞凋亡率。(4)将100μl浓度为2×104个细胞/ml的HEC-1B细胞和2×104个细胞/ml的WI-38细胞分别加入50ml培养瓶中,在37℃、5%CO2及饱和湿度条件下的CO2培养箱中培养,细胞完全贴壁生长后,分别加入120ng/ml的rhIL-24,10μg/ml的DDP,120ng/ml的rhIL-24联合10μg/ml的DDP,培养培养24h、48h,在荧光显微镜下分别观察细胞凋亡形态学变化。结果：1)120ng/ml的rhIL-24对HEC-1B细胞的生长抑制率分别是18.0%,rhIL-24的浓度过低和浓度过高,其抑制率均低于此浓度：rhIL-24对WI-38细胞无显著抑制作用；DDP的抑制率与DDP的不同浓度呈剂量依赖联系。(2)120ng/ml的rhIL-24联合10μg/ml的DDP,在24h,48h,72h对HEC-1B细胞的生长抑制率分别是59.0%,88.2%,91.9%；对WI-38细胞的生长抑制率分别是63.1%,88.7%,92.4%。(3)120ng/ml的rhIL-24,10μg/ml的DDP, FCM检测在24h时,HEC-1B细胞的凋亡率分别是：14.5%,26.8%；WI-38细胞凋亡率分别是：6.8%,17.1%。(4)120ng/ml的rhIL-24联合10μg/ml的DDP, FCM检测在24h时,HEC-1B细胞的凋亡率是：29.6%；WI-38细胞的凋亡率足：20.1%。(5)120ng/ml的rhIL-24,10μg/ml的DDP,120ng/ml的rhIL-24联合10μg/ml的DDP,荧光显微镜下观察细胞调亡形态变化,可见：正常细胞不着色：凋亡细胞染草绿色,可见细胞核呈不规律破坏或固缩呈圆珠状；非凋亡细胞的死亡细胞呈整体细胞染色。结论：(1)不同浓度的rhIL-24对子宫内膜癌细胞有抑制作用,其抑制呈非剂量依赖联系,其抑制适宜浓度为120ng/ml;不同浓度的DDP对子宫内膜癌细胞有抑制作用,其抑制呈剂量依赖联系,DDP对正常细胞亦有抑制作用。(2) rhIL-24、DDP及两者联合对子宫内膜癌细胞有抑制作用,联合抑制率高于单独用药,联合用药具有协同作用。(3) rhIL-24、DDP及两者联合诱导子宫内膜癌细胞凋亡,rhIL-24通过凋亡机制抑制肿瘤细胞生长，对WI-38细胞无抑制,表明可通过凋亡机制抗肿瘤。关键词：白细胞介素-24论文顺铂论文子宫内膜癌细胞论文抑制作用论文
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英汉缩略词表4-5

摘要5-8

Abstract8-10

前言10-12

材料与策略12-17

结果17-31

讨论31-35

结论35-36