致谢4-5
摘要5-6
Abstract6-9
1 绪论9-24
1.1 引言9
1.2 长牡蛎(Crassostreagigas)9-11
1.3 Caspase家族11-16
1.3.1 Caspase结构与分类11-13
1.3.2 Caspase活化13-14
1.3.3 Caspase家族功能14-15
1.3.4 Caspase的作用底物及抑制剂15-16
1.3.5 软体动物中Caspase的探讨进展16
1.4 细胞凋亡16-23
1.4.1 凋亡细胞形态特点16-18
1.4.2 Caspase介导的细胞凋亡途径18-21
1.4.3 H_2O_2及PDTC诱导凋亡机制21
1.4.4 细胞凋亡功能21-22
1.4.5 细胞凋亡的检测策略22-23
1.5 探讨的目的和作用23-24
2 CgCASPl基因全长的克隆24-33
2.1 材料策略24-29
2.1.1 实验材料24-25
2.1.2 实验策略25-29
2.2 结果29-32
2.2.1 CgCASPl基因克隆及序列浅析29-31
2.2.2 CgCASPl基因与其他物种Caspase比较31-32
2.3 讨论32-33
3 CgCASPl基因验证及Real-timePCR表达浅析33-39
3.1 材料策略33-36
3.1.1 实验材料33-34
3.1.2 实验策略34-36
3.2 结果36-38
3.2.1 CgCASPl基因在cDNA水平上的验证36-37
3.2.2 Caspase片段在基因组水平上的验证37
3.2.3 不同组织与各幼虫时期CgCASPl基因的表达分布37-38
3.3 讨论38-39
4 CgCASPl基因与凋亡相关性的初步探讨39-46
4.1 材料策略39-42
4.1.1 实验材料39-40
4.1.2 实验策略40-42
4.2 结果42-44
4.2.1 原代细胞中Caspase表达浅析42
4.2.2 PDTC、H_2O_2刺激后CgCASPl和repsh基因的表达变化42-43
4.2.3 PDTC、H_2O_2刺激后Repsh蛋白的表达变化43-44
4.3 讨论44-46
5 CgCASPl 重组蛋白的体外表达46-54
5.1 材料策略46-51
5.1.1 实验材料46-48
5.1.2 实验策略48-51
5.2 结果51-52
5.2.1 CgCASPl重组蛋白的原核表达51-52
5.2.2 CgCASPl重组蛋白的真核表达52
5.3 讨论52-54
结论54-55