加味加味黄连温胆汤调控PI3K通路改善代谢综合征大鼠胰岛素抵抗

摘要：目的：通过探讨加味黄连温胆汤对代谢综合征大鼠各异常组分、脂肪细胞因子及骨骼肌P13K信号通路的干预作用,探讨该方药对MS大鼠脂肪细胞因子与该信号通路的影响,以及二者间的相互作用,并且对加味黄连温胆汤干预该信号通路的机制进行探讨。策略：利用高脂高糖高盐饲料喂养8周龄雄性SD大鼠20周,饲喂20周后,一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ,30mg/kg)。建立MS模型大鼠后,将MS大鼠随机分为5组,即：模型组、西药组、高、中、低剂量组。西药组给予格华止干预；黄连温胆汤高、中、低剂量组予不同剂量的加味黄连温胆汤灌胃；模型组给予蒸馏水灌胃。各组大鼠灌服相应药物4周。实验期间动态测量各组大鼠基础指标,包括：体重、腹围、收缩压、空腹血糖、血清胰岛素、血脂等,并计算HOMA-IR、Lee's指数同时作为筛选模型的评价标准。药物干预后除检测上面陈述的指标外,采取比色法测定FFA,放射免疫法测定TNF-α及LEP,利用HE染色及免疫组化法测定大鼠骨骼肌IRS-1、GLUT-4,同时采取RT-PCR检测大鼠骨骼肌IRS-1mRNA表达情况,Western blot法检测大鼠骨骼肌IRS-1、P13K、GLUT-4蛋白表达。结果：1.利用高脂高糖高盐饲料饲喂及注射STZ后的大鼠与空白组大鼠相比,大鼠体重、收缩压、空腹血糖、血清胰岛素、TC及TG等指标显著升高,差别均具有统计学作用(P0.05)。2.药物干预后,黄连温胆汤高剂量组大鼠体重、收缩压、Lee's指数、内脏脂肪重量、内脏脂肪体重比、FBG、FINS、HOMA-IR.TG及TC均降低,与模型组相比,均具有统计学作用(P0.05)。3.药物干预后,黄连温胆汤高剂量组大鼠FFA、TNF-α、LEP水平与模型组相比显著降低,差别具有统计学作用(P0.05)。4.药物干预后,黄连温胆汤高剂量组大鼠骨骼肌IRS-1mRNA的表达高于模型组大鼠,且差别具有统计学作用(P0.05)。5.药物干预后,黄连温胆汤高剂量组大鼠骨骼肌IRS-1、P13K、GLUT-4蛋白表达水平与模型组相比显著提升,差别具有统计学作用(P0.05)。6.在相关性探讨中发现,FFA、LEP、TNF-α三者与IRS-1均有相关性,且三者与IRS-1均成负相关,以IRS-1与LEP呈负相关最为显著(r=-0.641,P0.01)。结论：1.加味黄连温胆汤具有降低MS大鼠体重、收缩压、血糖、血清胰岛素作用,同时可以调脂、减轻大鼠胰岛素抵抗,但以高剂量效果显著。2.加味黄连温胆汤在不同程度上降低MS大鼠脂肪细胞因子如：FFA、LEP、TNF-α水平,以而减轻炎症反应。这可能与加味黄连温胆汤可以降重、降糖、调脂、减轻胰岛素抵抗有关。3.加味黄连温胆汤可以上调MS大鼠骨骼肌IRS-1mRNA表达,进而激活IRS-1-PI3K-GLUT-4信号转导通路,提升大鼠骨骼肌对葡萄糖的吸收与利用水平,改善胰岛素抵抗。4.加味黄连温胆汤可能通过降低MS大鼠脂肪细胞因子：FFA、LEP、TNF-α水平来上调MS大鼠骨骼肌IRS-1、P13K及GLUT-4蛋白的表达,以而增强MS大鼠骨骼肌胰岛素信号转导,改善糖代谢及IR,这可能是加味黄连温胆汤防治MS的机制之一。关键词：代谢综合征论文加味黄连温胆汤论文胰岛素抵抗论文PI3K信号通路论文脂肪细胞因子论文

缩略语表5-6

中文摘要6-8

英文摘要8-10

前言10-11

文献综述11-30

1.代谢综合征现代医学探讨进展11-21

1.1.代谢综合征的命名11-12

1.2.代谢综合征的诊断标准12-15

1.3.代谢综合征的流行病学15-16

1.4.代谢综合征的病理、生理机制16-20

1.5.代谢综合征的预防及治疗20-21

2.代谢综合征中医学探讨进展21-24

2.1.代谢综合征的中医病因病机21-23

2.2.代谢综合征的中医治疗进展23-24

3.黄连温胆汤的探讨进展24-27

3.1.黄连温胆汤的历史沿革24

3.2.黄连温胆汤的临床运用24-26

3.3.加味黄连温胆汤的方药浅析26-27

4.造模策略的选择27-28

5.不足与展望28-30

实验一 代谢综合征大鼠模型的建立30-40

1.材料和策略30-32

1.1.主要材料及试剂30

1.2.主要仪器设备30

1.3.实验策略30-31

1.4.实验标本采集31

1.5.检测指标及策略31-32

1.6.统计学处理32

2.结果32-36

2.1.大鼠一般状态32-33

2.2.大鼠体重的变化情况33

2.3.大鼠血压及心率的变化情况33-34

2.4.大鼠血糖的变化情况34

2.5.大鼠血清胰岛素的变化情况34

2.6.大鼠血脂的变化情况34-35

2.7.大鼠成模判定标准及成模率35

2.8.成模后两组大鼠基础指标比较35-36

3.讨论36-40

3.1.成模标准的确立36-37

3.2.成模大鼠的特点37-40

实验二 加味黄连温胆汤对MS大鼠体脂及糖脂代谢的影响40-48

1.材料和策略40-41

1.1.主要材料及试剂40

1.2.主要仪器设备40

1.3.实验策略40

1.4.实验标本采集40-41

1.5.检测项目及策略41

1.6.统计学处理41

2.结果41-43

2.1.各组大鼠体脂水平41-42

2.2.各组大鼠糖代谢水平42

2.3.各组大鼠脂代谢水平42-43

2.4.各组大鼠收缩压及心率水平43

3.讨论43-48

3.1.加味黄连温胆汤对MS大鼠体脂的影响43-44

3.2.加味黄连温胆汤对MS大鼠糖代谢的影响44-45

3.3.加味黄连温胆汤对MS大鼠脂代谢的影响45-46

3.4.加味黄连温胆汤对MS大鼠收缩压的影响46-48

实验三 加味黄连温胆汤对MS大鼠脂肪细胞因子及骨骼肌PI3K信号通路的影响48-77

1.材料和策略48-58

1.1.主要材料及试剂48

1.2.主要仪器设备48-49

1.3.实验策略49

1.4.实验标本采集49

1.5.检测项目及策略49-58

1.6.统计学处理58

2.结果58-66

2.1.各组大鼠血清FFA、TNF-α及LEP水平58-59

2.2.各组大鼠骨骼肌HE染色结果59

2.3.各组大鼠骨骼肌免疫组化结果59-60

2.4.各组大鼠骨骼肌RT-PCR检测结果60-62

2.5.各组大鼠骨骼肌Western-Blot检测结果62-65

2.6.IRS-1与脂肪细胞因子的相关性65-66

3.讨论66-77

3.1.加味黄连温胆汤对MS大鼠脂肪细胞因子的影响67-69

3.2.加味黄连温胆汤对MS大鼠骨骼肌PI3K信号通路的影响69-73

3.3.IRS-1与脂肪细胞因子相关性浅析73-77

结论77-78

致谢78-79