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摘要：目的：Delta样配体4（delta-pke pgand4, DLL4）是Notch家族配体之一，受血管内皮生长因子(vascular endothepal growth factor, VEGF）上调，在肿瘤血管生成中发挥作用。异种移植探讨表明抑制DLL4-Notch信号通路能克服对抗VEGF治疗抵抗的作用。本实验通过测定DLL4、VEGF在乳腺癌组织及癌旁正常乳腺组织中的表达，并用CD34标记血管内皮细胞，计算微血管密度（microvessel density, MVD）；探讨DLL4、VEGF的表达与乳腺癌血管生成及其临床病理学特点（淋巴结转移、组织分级、患者年龄、肿瘤直径、临床分期）的联系。策略：1.采取手术后的乳腺癌组织石蜡标本60例，另取20例癌旁正常乳腺组织作对照。2.采取免疫组织化学技术（SP法）检测DLL4蛋白、VEGF蛋白和CD34蛋白标记的MVD在癌旁正常乳腺组织、乳腺癌组织中的表达。3.统计学处理：t检验，Pearson χ2检验或连续性校正χ2检验，spearman相关浅析，检验标准为P＜0.05有统计学作用。结果：1.免疫组化结果显示DLL4蛋白主要在肿瘤细胞的细胞质和细胞膜表达，VEGF蛋白主要表达在肿瘤细胞细胞质，CD34定位于血管内皮的细胞膜和细胞浆，均呈棕。DLL4在乳腺癌组织的阳性表达率为75%（45/60），显著高于在癌旁正常乳腺组织阳性表达率15%（3/20）（χ~2=22.500，P＜0.001）；VEGF在乳腺癌组织的阳性表达率为70%（42/60），显著高于在癌旁正常乳腺组织的阳性表达率20%（4/20）（χ2=15.345，P＜0.001）；MVD在乳腺癌组织的计数为140.827±22.390，高于在癌旁正常乳腺组织中计数41.57±6.588（t=30.592，P＜0.001）。2.60例乳腺癌组织中，DLL4蛋白在有淋巴结转移组中转移的表达93.10%（27/29）,高于在无淋巴结转移组中的表达58.06%（18/31）（χ~2=9.811，P=0.002）；DLL4蛋白在组织学分级Ⅲ级组表达为100%（15/15），显著高于在Ⅰ～Ⅱ级组表达66.67%（30/45）（χ~2=5.007，P=0.025）；DLL4蛋白在肿瘤直径＞2cm组表达为83.78%（31/37），显著高于在肿瘤直径≤2cm组表达60.87%（14/23）（χ~2=3.972，P=0.046）；DLL4蛋白在临床分期Ⅱ～Ⅲ期组表达83.72%（36/43），高于在临床分期Ⅰ期组表达为52.94%（9/17）（χ~2=4.624，P=0.032）。DLL4蛋白在年龄≤50岁组表达为64.52%（20/31），与年龄＞50岁组的表达86.21%（25/29）相比差别无统计学作用（χ~2=3.760，P=0.053）。3.60例乳腺癌组织中，VEGF蛋白在淋巴结未转移组及淋巴结转移组的表达分别为41.94%（13/31）、100%（29/29），两组比较有着差别（χ~2=24.056，P＜0.001）。VEGF蛋白在组织学分级Ⅰ～Ⅱ级组、Ⅲ级组表达分别为60%（27/45）、100%（15/15），两组间有着差别（χ~2=6.772，P=0.009）； VEGF蛋白在临床分期Ⅰ期组、Ⅱ～Ⅲ期组表达依次增高，分别为41.18%（7/17）、81.40%（35/43），有着差别（χ~2=9.384，P=0.002）。VEGF蛋白在肿瘤直径≤2cm组及＞2cm组的表达分别为60.87（%14/23）、75.68%（28/37），差别无统计学作用（χ~2=1.481，P=0.224）。VEGF蛋白在年龄≤50岁组及＞50岁组的表达分别为64.52%（20/31）、75.86%（22/29），差别亦无统计学作用（χ~2=0.918，P=0.338）。4.60例乳腺癌组织中，DLL4蛋白阳性表达的MVD值为148.191±18.607，高于其阴性表达的MVD值118.733±18.101（t=-5.345，P＜0.001）；VEGF蛋白阳性表达的MVD值为149.810±17.034，高于其阴性表达的MVD值119.867±19.386（t=-5.680，P＜0.001）。且DLL4、VEGF均为阳性表达的MVD值152.822±15.141，显著高于DLL4、VEGF均为阴性表达或只有一项阳性表达的MVD值121.530±18.392（t=-6.844，P＜0.001）。5.相关性浅析显示，乳腺癌组织中DLL4的表达与VEGF及MVD值呈显著正相关(rs=0.462，P=0.001；rs=0.553，P＜0.001)，VEGF的表达与MVD值呈显著正相关（rs=0.586，P＜0.001）。结论：1.DLL4蛋白、 VEGF蛋白、MVD在乳腺癌组织中表达均显著高于癌旁正常乳腺组织，高表达可能提示预后不良。2.乳腺癌组织DLL4和VEGF蛋白的表达与淋巴结转移、组织学分级和临床分期密切相关，DLL4蛋白还与肿瘤直径密切相关，提示两者可能在乳腺癌的浸润和转移中起着重要作用。乳腺癌组织MVD值随着DLL4、VEGF表达强度的增强而升高，提示两者可能在乳腺癌组织的微血管形成中有一定的作用。3.DLL4、VEGF在乳腺癌组织中的表达呈正相关，且均与MVD呈正相关，提示VEGF可能是上调DLL4的重要因素之一，两者在乳腺癌组织浸润、转移及微血管形成中可能有协同作用。关键词：Delta样配体4论文血管内皮生长因子论文微血管密度论文乳腺肿瘤论文免疫组织化学论文
摘要4-7
ABSTRACT7-11
前言11
材料与策略11-15
结果15-19
附图19-23
附表23-26
讨论26-31
结论31