探究纯化芒果叶活性物质分离与其抗氧化性

摘要：本论文以芒果叶为实验原料,主要探讨了超声波提取、微波提取、回流提取三种提取策略对金煌芒、四季蜜芒、爱文芒、台农一号芒四个品种芒果叶中的黄酮和多酚含量及其抗氧化活性的影响,采取硅胶柱层析、TLC分离纯化具有较高抗氧化活性的金煌芒与四季蜜芒粗提物,通过Hplc浅析这两种芒果叶中具有抗氧化活性的化学成分。主要实验结果如下：1超声波提取的金煌,四季蜜芒,爱文芒,台农一号芒果叶中多酚与黄酮含量最高,其总黄酮含量分别为：(52.27±1.18)mg/mL；(36.53±0.78)mg/mL；(13.10±0.45)mg/mL；(8.21±0.16)mg/mL,其多酚含量分别为(18.78±0.24) mg/mL；(14.58±0.11)mg/mL；(9.24±0.43)mg/mL；(6.71±0.057)mg/mL.2在任一种提取策略中,四个品种芒果叶对·OH及DPPH自由基清除效果为：金煌芒四季蜜芒爱文芒台农一号芒,四个品种芒果叶对两种自由基的清除作用几乎都高于作为对照的同等浓度的Vc溶液。3以芒果叶中总黄酮对自由基清除的IC50值来衡量其对抗氧化性影响时,超声波提取法影响最小,回流提取法影响最大。超声波提取时：金煌、四季蜜芒、爱文芒、台农一号芒对·OH清除的IC50值分别为(0.85±0.014)ug/mL,(0.92±0.014)ug/mL,(1.29±0.04)ug/mL,(1.89±0.07) ug/mL；金煌、四季蜜芒、爱文芒、台农一号芒对DPPH清除的IC50值分别为：(3.84±0.06)ug/mL,(6.99±0.06)ug/mL,(9.42±0.11)ug/mL,(12.24±0.06) ug/mL。回流提取时：金煌,四季蜜芒,爱文芒,台农一号芒对·OH清除的IC50值分别为(0.89±0.028)ug/mL,(1.73±0.04)ug/mL,(1.83±0.04)ug/mL,(2.72±0.01)ug/mL;金煌芒,四季蜜芒,爱文芒,台农一号芒对DPPH清除的IC50值分别为：(5.25±0.08)ug/mL,(7.99±0.01)ug/mL,(10.67±0.15)ug/mL,(12.79±0.14)ug/mL。4通过硅胶柱层析分离组分与特定试剂颜色反应,初步鉴定出金煌芒与四季蜜芒芒果叶中主要的抗氧化作用物质应为黄酮类,二氢黄酮类及含有邻三羟基结构的黄酮类物质,采取石油醚-乙酸乙酯-甲醇-乙酸(1：4：0.5：0.5)(1：5：0.5：0.5)(1：6：0.5：0.5)(1：7：0.5：05)的洗脱剂洗脱样品,金煌芒洗脱后的组分S6及四季蜜芒洗脱后组分J4两种组分中黄酮含量最高,分别为：(22.46±3.42)mg/mL和(10.78±0.19)mg/mL。此时两组分对羟基自由基的清除效果最强,当样液浓度为1.0mg/mL时,清除率分别为98.86%和71.54%。5对金煌芒与四季蜜芒中抗氧化性强的组分进行HPLC浅析,结果显示四季蜜芒与金煌芒的分离组分中均含有芒果苷,四季蜜芒分离组分中具有抗氧化作用的物质可能主要为芒果苷,而在金煌芒分离组分中具有抗氧化作用的物质则可能主要为极性略强于芒果苷的槲皮素,山奈酚等物质以及芒果苷。关键词：芒果叶论文总黄酮论文总多酚论文抗氧化活性论文分离纯化论文高效液相色谱论文

摘要4-6

ABSTRACT6-13

第一章 绪论13-21

1.1 芒果叶的概述13

1.2 芒果叶的国内外探讨动态13-14

1.3 自由基14-15

1.3.1 自由基概述14

1.3.3 体外自由基清除的检测策略14-15

1.4 常见的天然的抗氧化活性物质15-18

1.4.1 多酚类15-16

1.4.2 类黄酮16

1.4.3 糖和苷类16-17

1.4.4 维生素类17-18

1.5 天然活性成分的提取策略18-20

1.5.1 水蒸气蒸馏提取18

1.5.2 溶剂提取18-19

1.5.3 超声波辅助提取19

1.5.4 微波辅助提取19

1.5.5 超临界流体提取19-20

1.6 课题探讨目的和作用20

1.7 探讨内容20-21

第二章 芒果叶中抗氧化粗提物的提取及其抗氧化能力探讨21-40

2.1 材料与策略21-25

2.1.1 原料与试剂21-22

2.1.2 实验仪器22

2.1.3 原材料的处理22

2.1.4 提取策略22-23

2.1.5 测定策略23-24

2.1.6 不同提取策略对不同品种芒果叶黄酮含量的影响24

2.1.7 不同提取策略对不同品种芒果叶多酚含量的影响24

2.1.8 不同提取策略下,不同芒果叶提取液中总黄酮和抗氧化能力的联系24-25

2.1.9 不同提取策略下,不同芒果叶提取液中总多酚和抗氧化能力的联系25

2.2 结果与浅析25-39

2.2.1 不同提取策略对不同品种芒果叶中黄酮提取的影响结果25-26

2.2.2 不同提取策略对不同品种芒果叶中多酚提取的影响结果26-27

2.2.3 不同提取策略下,不同芒果叶提取液中总黄酮和抗氧化能力的联系27-33

2.2.4 不同提取策略下,不同芒果叶提取液中总多酚和抗氧化能力的联系33-39

2.3 本章小结39-40

第三章 芒果叶抗氧化活性物质的分离纯化40-55

3.1 材料与策略40-44

3.1.1 原料与试剂40

3.1.2 主要设备和仪器40-41

3.1.3 硅胶柱层析分离芒果叶粗提物41-43

3.1.4 TLC分离纯化芒果叶中抗氧化物质43-44

3.2 结果与讨论44-53

3.2.1 硅胶柱层析洗脱剂的确定44-45

3.2.2 硅胶柱层析洗脱组分的定性鉴定45-48

3.2.3 硅胶柱层析分离组分中总黄酮含量及对羟基自由基(·OH)的清除能力48-51

3.2.4 TLC分离得到各组分质量及其抗氧化能力测定结果51-53

3.3 本章小结53-55

第四章 芒果叶抗氧化活性物质的鉴定55-62

4.1 材料与策略55-56

4.1.1 原料与试剂55

4.1.2 仪器设备55

4.1.3 色谱检测条件的选择55

4.1.4 样品和标准品的Hplc鉴定与含量测定55-56

4.2 结果与浅析56-61

4.2.1 确定色谱的检测条件56

4.2.2 标准品的色谱图及标准曲线56-57

4.2.3 样品的HPLC色谱图及鉴定结果57-61

4.3 本章小结61-62

第五章 结论与展望62-64

5.1 论文结论62-63

5.2 论新点63

5.3 课题展望63-64