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摘要：目的利用体外培养成骨细胞，探讨δ阿片受体激动剂(DADLE)对血清饥饿诱导成骨细胞凋亡的影响并探讨其机制。策略出生24小时以内的SD（Sprague-Dawley）大鼠，在无菌的条件下，取出颅盖骨，进行体外培养原代成骨细胞，相差显微镜观察细胞形态和增殖情况；碱性磷酸酶(P)染色后利用Gomori改良钙钴法鉴定成骨细胞。建立成骨细胞凋亡模型：将分离、培养出的原成骨细胞，更换不含小牛血清的培养基，培养48h，造成血清饥饿条件，诱导成骨细胞凋亡模型。随机分为5组：对照组（Control）：体外培养的原代成骨细胞；饥饿组（Model）：成骨细胞凋亡模型；DADLE组：饥饿条件下给予1μmol·L~(-1)DADLE培养48h；DADLE+NAL组：饥饿条件下给予1μmol·L~(-1)DADLE和10μmol·L~(-1)Naltrindole培养48h；DADLE+GFX组：饥饿条件下给予1μmol·L~(-1)DADLE和10μmol·L~(-1)GF109203X培养48h。用MTT法检测细胞存活率，流式细胞仪浅析细胞周期，Annexin V-FITC/PI双标记法测定细胞凋亡率；Western blot测定PKC和Caspase-3蛋白表达。结果新生乳鼠颅盖骨分离出的原代成骨细胞，形态呈小圆球形,可见透亮的细胞膜，在胞内可见黑点状的胞核,均匀分布。培养第3-4天,细胞融合成单层。经碱性磷酸酶(P)染色、Gomori改良钙钴法鉴定，细胞膜周围可见呈棕黑色细微颗粒,表明分离出的细胞为原代成骨细胞。新生大鼠原代成骨细胞经去血清培养48h后，可见显著的凋亡现象发生，体现为细胞活力降低，凋亡率增加，S+G2+M期百分比降低，出现了Caspase-3的表达增强及PKC表达降低，与Control组相比差别有显著统计学作用（P﹤0.01）；给予DADLE处理可显著抑制由血清饥饿导致的成骨细胞凋亡，体现为细胞存活率增加，凋亡率降低，S+G2+M期百分比升高，Caspase-3表达下降，PKC表达增加，与Model组相比差别有显著性（P﹤0.01）；但上面陈述的这种现象可被Naltrindole所拮抗；且GF109203X亦可使DADLE的这种抑制细胞凋亡的作用消失，DADLE+NAL组、DADLE+GFX组体现为细胞存活率降低，凋亡率增加；S+G2+M期百分比降低；caspase-3表达增加；PKC表达下降，与DADLE组相比，差别有显著性（P﹤0.01），但与Model组相比无统计学差别。结论DADLE激活δ阿片受体对血清饥饿诱导的成骨细胞凋亡起保护作用，且这种作用是通过PKC途径实现的。关键词：δ阿片受体论文血清饥饿论文成骨细胞论文凋亡论文PKC论文
中文论著摘要4-6
英文论著摘要6-9
英文缩略语表9-10
前言10-11
实验材料与策略11-15
实验结果15-21
讨论21-24
结论24-25
本探讨革新性的自我评价25-26