摘要：山莓(Rubus corchorifopus L.f.)系蔷薇科(Rosaceae)蔷薇亚科悬钩子属植物(Rubus.L)中的一种落叶灌木,野生资源蕴藏量大。山莓作为传统的药用植物,已有悠久的运用历史,但其药效成分和药理作用基础并不清楚。本论文以山莓叶为探讨对象,在其活性成分分离浅析鉴定及生物活性等方面做了系统而深入的探讨。实验结果为开发山莓这一药用植物资源奠定了论述基础。其主要探讨结果如下：1黄酮类化合物是山莓的有效成分之一,建立亚硝酸钠-硝酸铝显色法测定山莓叶中总黄酮的含量,正交试验优化得到山莓叶总黄酮的最佳提取条件为乙醇浓度为60%、水浴温度80℃、提取时间1.5h。测定不同月份山莓叶黄酮的含量为0.134%～0.346%。采取溶剂提取、柱色谱分离等策略分离得到槲皮素1；槲皮素-3-O-芸香糖苷(这个化合物即为芦丁)2；山奈酚-3-O-β-D-(6”-对羟基桂皮酰基)-葡萄糖苷3。其中化合物1,2为首次以该植物中得到。2探讨了山莓叶黄酮单体化合物的抑菌活性及抗氧化活性。当槲皮素浓度为5mg/mL时,对大肠杆菌、金葡萄球菌、痢疾志贺氏菌、苏云金杆菌大肠杆菌、痢疾志贺氏菌抑菌作用显著,抑菌效果优于中药黄连素。山莓叶黄酮单体化合物对Fenton系统产生的羟自由基清除具有良好的量效联系,为山莓抗菌消炎、抗腹泻作用提供论述依据。3采取水蒸气蒸馏、同时蒸馏萃取、微波辅助蒸馏三种策略比较提取山莓叶挥发油,优化提取条件。建立3-10月份山莓挥发油的GC指纹图谱,发现3-10月份的山莓叶挥发油共了8个共有峰,以期为综合评价山莓及其挥发油的质量提供依据。首次采取刃天青显色法探讨发现山莓叶挥发油对大肠杆菌、沙门氏菌、金葡萄球菌、痢疾志贺氏菌、苏云金杆菌最低抑菌浓度(MIC)分别为62.5ug/mL.62.5ug/mL、125ug/mL、31.25ug/mL、15.6ug/mL,对痢疾志贺氏杆菌的最低抑菌浓度低于卡拉霉素标准品的最低抑菌浓度。首次采取DPPH法对山莓叶挥发油进行抗氧化活性初步探讨,山莓叶挥发油、芦丁、Vc半清除率EC5o分别为121.945μg/mL、6.326μg/mL、4.817μg/mL,发现山莓叶挥发油具有一定抗氧化能力。4采取溶剂萃取、硅胶柱色谱、高速逆流色谱及重结晶等策略以山莓叶中分离得到化合物五个对映贝壳杉烷型二萜类化合物,综合运用UV、IR、MS、1D-NMR、2D-NMR策略鉴定其结构分别为：对映-3α,16β,17,19-四羟基-贝壳杉烷-19-乙酸酯4；对映-3α,16β,17,19-四羟基-贝壳杉烷-19-乙酸酯-17-O-β-D-吡喃葡萄糖苷5：对映-3β,16β,17-贝壳杉-三醇6；对映-,16p,17,19-贝壳杉-四醇7；对映-2-羰基-16β-羟基-贝壳杉-17-O-β-D-葡萄糖苷8；其中化合物4、5为新化合物,化合物6首次以该植物中得到。5利用高效液相色谱建立了山莓叶新二萜含量的检测策略,其线性回归方程为y=5×106x-10147,r=0.9942。表明二萜含量在0.139～0.695mg/mL范围内与吸光值线性联系良好,测定了不同月份山莓叶二萜的含量为0.656%-1.571%。K-B滤纸片测定发现新二萜单体化合物对金葡萄球菌、痢疾志贺氏菌、大肠杆菌无显著抑制作用。MTT探讨山莓新二萜化合物对HepG2肝癌细胞有一定的抑制作用,药品浓度与抑制率呈正相关,但其抑制率比5-FU低,可用于制备抗肿瘤保健品。关键词：山莓叶论文活性成份论文结构鉴定论文生物活性论文
摘要4-6
Abstract6-12
第一章 绪论12-26
1 山莓的探讨进展12-15
1.1. 山莓资源分布与近况12
1.2 山莓的化学成分探讨12-14
1.3 山莓药理作用探讨14-15
2 悬钩子属植物的探讨进展15-26
2.1 悬钩子属常用的药用植物15-18
2.2 悬钩子属植物化学成分探讨18-21
2.3 悬钩子属植物药理作用探讨进展21-24
2.4 立题的依据与作用24-26
第二章 山莓叶黄酮提取分离纯化及结构鉴定26-39
1 山莓叶黄酮类化合物的提取优化及不同月份含量测定26-32
1.1 材料与策略26-28
1.3 结果与浅析28-32
1.4 讨论32
2 山莓叶黄酮化合物的分离纯化及结构鉴定32-39
2.1 材料与策略32-34
2.3 黄酮类化合物的结构鉴定34-36
2.4 黄酮类化合物理化数据36-37
2.5 讨论37-39
第三章 山莓黄酮抑菌活性及抗氧化活性探讨39-49
1 山莓黄酮类化合物抑菌活性探讨39-43
1.1 材料与策略39-40
1.2 结果与浅析40-42
1.3 讨论42-43
2 山莓黄酮类化合物抗氧化活性探讨43-49
2.1 材料与策略43-44
2.2. 结果与讨论44-48
2.3 讨论48-49
第四章 山莓叶挥发油提取及指纹图谱探讨49-56
1 山莓叶挥发油提取优化及不同月份挥发油指纹图谱49-56
1.1 材料与策略49-51
1.2 结果与浅析51-55
1.4 讨论55-56
第五章 山莓叶挥发油抑菌活性及抗氧化活性探讨56-63
1 山莓挥发油抑菌活性及最小抑菌浓度(MIC)测定56-58
1.1 材料与策略56-57
1.2 山莓挥发油抑菌试验结果57-58
1.3 讨论58
2 山莓挥发油的抗氧化活性探讨58-63
2.1 材料与策略58-60
2.2 结果与浅析60-62
2.3 讨论62-63
第六章 山莓叶二萜提取分离与鉴定63-76
1 材料与策略63-76
1.1 材料63
1.2 提取分离与纯化63-67
1.3 结果与浅析67-75
1.4 讨论75-76
第七章 山莓叶新二萜含量测定及生物活性探讨76-88
1 山莓叶二萜化合物提取优化及不同月份含量测定76-83
1.1 材料与策略76-79
1.2 结果与浅析79-82
1.3 讨论82-83
2 山莓叶新二萜的抑菌活性作用83-84
2.1 材料与策略83-84
2.2 结果与浅析84
3 MTT法探讨山莓新二萜抗肿瘤活性84-88
3.1 材料与策略84-86
3.2 结果与浅析86-87
3.3 讨论87-88
全文总结88-91
1 探讨结果88-90
2 革新点90
3 有待探讨的几个不足90-91
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