摘要3-4
ABSTRACT4-7
第一章 文献综述7-17
1.1 酵母菌介绍7-10
1.1.1 酿酒酵母介绍7-8
1.1.2 白念珠菌介绍8-10
1.2 蛋白磷酸酯酶10-16
1.2.1 酿酒酵母中的 PP2C 类蛋白磷酸酯酶12-14
1.2.2 白念珠菌中的 PP2C 类蛋白磷酸酯酶14-16
1.3 本论文的探讨内容及作用16-17
第二章 实验材料与策略17-31
2.1 实验材料17-25
2.1.1 实验用菌株、质粒以及引物17-19
2.1.2 实验试剂19-20
2.1.3 实验室所用试剂盒20
2.1.4 实验所用溶液及其配制20-22
2.1.5 实验用培养基22-24
2.1.6 实验仪器24-25
2.2 实验策略25-31
2.2.1 菌株的传代与保存25
2.2.2 碱裂解法制备质粒 DNA25-26
2.2.3 质粒转化大肠杆菌感受态细胞26-27
2.2.4 白念株菌基因组的提取27
2.2.5 PCR 反应系统的建立27-29
2.2.6 酶切反应系统的建立29
2.2.7 连接系统的建立29-30
2.2.8 倍比稀释30
2.2.9 图像的采集和处理30
2.2.10 生物信息学策略30-31
第三章 实验结果与讨论31-55
3.1 敲除盒的构建31-40
3.1.1 p5921-CaPTC5AB 敲除盒的构建31-34
3.1.2 pMD18-CaHis1-CaPTC5CD 敲除盒的构建34-36
3.1.3 pMD18-CaURA3-CaPTC5CD 敲除盒的构建36-40
3.2 缺失株的构建40-53
3.2.1 CaPTC5 CaPTC6 缺失株的构建40-45
3.2.2 CaPTC5 CaPTC7 缺失株的构建45-50
3.2.3 CaPTC5 CaPTC6 CaPTC7 缺失株的构建50-53
3.3 缺失株的表型筛选结果53-55
第四章 总结与展望55-56
4.1 工作总结55
4.2 展望55-56