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Abstract5-7
目录7-9
第一章 绪论9-21
1.1 肿瘤生成中的关键信号转导通路9-17
1.2 p150~(sal2)抑制肿瘤生长17-19
1.3 课题作用及探讨内容19-21
第二章 实验材料21-24
1 质粒、菌株和细胞21
2 主要实验试剂21-22
3 主要实验仪器22-24
第三章 实验策略24-32
1 质粒构建24-28
2 细胞培养28
3 PEI 介导的瞬时转染28
4 基因芯片28-29
5 双荧光素酶报告基因检测系统检测29-30
6 免疫印记30-31
7 流式细胞仪检测细胞周期31-32
第四章 实验结果32-57
1 利用基因芯片初步筛选 p1 50~(sal2)下游基因32-36
1.1 芯片初步筛选得到约 2000 个表达差别 1.5 倍以上基因32-33
1.2 差别基因 GO(Gene Ontology)分类浅析33-35
1.3 与肿瘤生成密切相关的表达差别基因35-36
2 双荧光素酶报告基因检测系统对 p150~(sal2 )下游基因的筛选36-42
2.1 promoter-pGL3-Luc 启动子 - 报告基因重组质粒的构建36-39
2.2 筛选得到的下游基因39-42
3 p150~(sal2)对 p16 启动子的调控及其作用位点42-49
3.1 p150~(sal2) 上调 p16 并呈质量正相关42-43
3.2 p16 启动子突变质粒的构建43-45
3.3 p150~(sal2) 通过 GGGNGGG 位点上调 p1645-47
3.4 进一步证实 p150~(sal2)通过 GGGNGGG 位点上调 p1647-49
4 p150~(sal2) 通过 p16 对细胞生长的调控49-57
4.1 Western blot 验证 p150~(sal2) 上调 p16 表达49-51
4.2 p150~(sal2) 通过 p16 调控细胞周期51-57
第五章 讨论57-59