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Abstract5-7
目录7-11
英文缩略表11-12
第一章 绪论12-18
1.1 暴发性肝衰竭概述12
1.2 暴发性肝衰竭的治疗情况12-13
1.2.1 内科药物治疗12
1.2.2 生物人工肝12-13
1.2.3 肝移植13
1.2.4 细胞移植13
1.3 间充质干细胞13-15
1.3.1 间充质干细胞的类型及其诱导分化14-15
1.3.2 干细胞移植的优势15
1.4 干细胞移植治疗肝衰竭的探讨近况15-18
1.4.1 干细胞在生物人工肝中的运用15-16
1.4.2 干细胞在治疗肝衰竭中的运用16
1.4.3 干细胞移植途径16-18
第二章 细胞的分离、培养与鉴定18-36
2.1 实验材料18-20
2.1.1 实验动物和细胞来源18
2.1.2 主要试剂18-19
2.1.3 主要试剂的配制19-20
2.2 实验策略20-22
2.2.1：肝细胞的分离、培养与形态学鉴定20-21
2.2.2 MSCs 的分离、培养与鉴定21
2.2.3 MSCs 的鉴定21-22
2.2.4 L02 细胞的培养及细胞损伤模型的建立22
2.3 实验结果22-33
2.3.1 肝细胞形态观察22-25
2.3.2 MSCs 形态观察25-28
2.3.3 MSCs 的表型的鉴定浅析28-31
2.3.4 L02 细胞形态和细胞损伤31-33
2.4 讨论33-36
第三章：MSCs 与肝细胞的共培养及其上清的收集36-45
3.1 实验材料和细胞来源36-37
3.1.1 实验材料和细胞来源36
3.1.2 主要试剂36-37
3.1.3 主要仪器37
3.2. 实验策略37-39
3.2.1 细胞的分离与培养37
3.2.2 共培养方式的选择37-38
3.2.3 共培养比例的确定38-39
3.2.4 共培养时间的确定39
3.2.5 共培养上清的收集39
3.3 实验结果39-43
3.3.1 细胞分离与共培养39-40
3.3.2 共培养方式的选择40-41
3.3.3 共培养方式比例的选择41-43
3.3.4 共培养方式时间的确定43
3.4 讨论43-45
第四章：细胞培养上清对 L02 细胞活力和增殖的影响45-56
4.1 实验材料45
4.2 主要试剂45
4.3 主要仪器45-46
4.4 实验策略46-48
4.4.1 普通培养组 L02 细胞活力和总蛋白含量检测46-47
4.4.2 损伤培养组细胞活力、总蛋白含量及细胞损伤的检测47-48
4.5 实验结果48-53
4.5.1 不同时间段的肝细胞上清对 L02 细胞活力的影响48
4.5.2 不同代数的 MSCs 上清对 L02 细胞活力的影响48-49
4.5.3 不同时间段的共培养上清对 L02 细胞活力的影响49-50
4.5.4 不同细胞上清对普通培养组 L02 细胞活力的影响50
4.5.5 不同细胞上清对普通培养组 L02 细胞总蛋白合成的影响50-51
4.5.6 不同细胞上清对损伤培养组 L02 细胞活力的影响51-52
4.5.7 不同细胞上清对损伤培养组 L02 细胞总蛋白合成的影响52
4.5.8 不同细胞上清对损伤培养组 L02 细胞 AST、LDH 漏出量的影响52-53
4.5.9 不同细胞上清对 L02 细胞凋亡的检测53
4.6 讨论53-56
第五章：细胞上清对肝衰竭动物的治疗56-68
5.1. 实验材料56
5.1.1 实验动物56
5.1.2 主要试剂56
5.2 实验策略56-58
5.2.1 肝衰竭动物模型的建立56-57
5.2.2 细胞上清对肝衰竭动物的治疗作用57
5.2.3 细胞上清成分浅析57-58
5.3 实验结果58-64
5.3.1：不同剂量的 D-Gal 对大鼠生活及存活率的影响58-59
5.3.2 不同剂量的 D-Gal 对大鼠肝脏功能的影响59
5.3.3 D-Gal 对大鼠肝组织形态学影响59-60
5.3.4 细胞上清对肝衰竭 KM 小鼠60-61
5.3.5 细胞上清对肝衰竭 S D 大鼠生化指标的影响61-62
5.3.6 抗体阵列法检测不同细胞培养上清中的细胞因子62-64
5.4 讨论64-68
第六章 全文总结68-70
6.1 论文总结68
6.2 本课题的特点与革新68-70
致谢70-71